一、血球计数板的使用方法
（1）构造：血球计数板是一块特制的载玻片，它的上表面有4条下凹的槽，构成3个平台，中间的平台又被一短横槽隔为两半，每半边各有一个方格网，每个方格网上有9个大小相等的大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用，这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm3.
（2）规格：
一种是大方格内分为25中方格，每一中格又分为16小方格；另一种是大方格内分为16中方格，每一中方格又分为25小方格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图：
（3）使用方法
①取清洁干燥的血球计数板，加盖玻片盖住网格和两边的槽。
②将待测菌液充分摇匀后，用无菌吸管吸少许，由盖玻片边缘或槽内加入计数板，使其自行渗入计数室内，计数室内不能有气泡。静置5-10分钟。
③在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数，上下调动细螺旋，以便看到小室内不同深度的菌体。位于分格线上的菌体，只数两条边上的，其余两边不计数。即数上线就不数下线，数左边线就不数右边线。
④计数时，若使用刻度为25中方格×16小方格的计数板，计数四个角的4个中方格，及中央1个中方格的菌数（即80小方格）；若使用刻度为16中方格×25小方格的计数板，就数四个角的4个中方格（即100小方格）内的菌数。每小方格中菌数以5-10个为宜，如菌液过浓可适当稀释。
⑤每个样品重复计数2-3次，取其平均值，按下式计算样品中的菌数。
刻度为25中方格×16小方格的计数板：
刻度为16中方格×25小方格的计数板：
⑥试验结束后要清洗和整理试验用具，特别注意血球计数板不能用试管刷蘸洗涤剂擦洗，正确的做法是浸泡和冲洗，洗后自行晾干或用吹风机吹干。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物，若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
二、血球计数板的计算公式
血球计数板的计算公式：红细胞数/L=N×5×10×稀释倍数，N为五个中方格的RBC总数。血球计数板优点：此法是在显微镜下直接进行测定，方便快捷并且仪器损耗较小。
计数需要注意的：
1、目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数。
2、以同样方法，分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度。
3、如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数。若更换物镜，目镜的放大倍数时，必须再进行校正标定。
三、血球计数板的计数公式
红细胞数(RBCs)/L=N×25/5×10×106×200
N为：五个中方格的RBC总数
N/5为：5个中方格（粉红色区域）的平均RBC数量（然后推及至中央大方格中每一个中方格RBC的数量）
N×25/5为：中央大方格RBC总数（即：0.1mm3（ul）的RBC总数）
N×25/5×10为：1mm3（ul）RBC总数
N×25/5×10×106为：1L的RBC总数
200为血液的稀释倍数
公式简化后：红细胞数/L=N×5×107×稀释倍数
公式前面部分都是换算成每微升血多少该计数细胞；最后都是由微升换算到升，乘以10的6次方
(1)目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数×10/两个重叠刻度间目镜测微尺格数
(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度.
(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数.若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定.
